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dc.contributor.authorLeonart, Letícia Paula, 1990-pt_BR
dc.contributor.otherPontarolo, Roberto, 1954-pt_BR
dc.contributor.otherGasparetto, João Cleversonpt_BR
dc.contributor.otherUniversidade Federal do Paraná. Setor de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticaspt_BR
dc.date.accessioned2020-07-16T12:59:11Z
dc.date.available2020-07-16T12:59:11Z
dc.date.issued2015pt_BR
dc.identifier.urihttps://hdl.handle.net/1884/37937
dc.descriptionOrientador : Prof. Dr. Roberto Pontarolopt_BR
dc.descriptionCo-orientador : Prof. Dr. João Cleverson Gasparettopt_BR
dc.descriptionDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa: Curitiba, 03/03/2015pt_BR
dc.descriptionInclui referênciaspt_BR
dc.descriptionÁrea de concentração: Insumos, medicamentos e correlatospt_BR
dc.description.abstractResumo: O objetivo deste trabalho foi avaliar qualitativamente os produtos de excreção da cumarina em urina humana. Participaram do presente estudo cinco voluntários adultos, que receberam via oral cápsulas contendo 500 mg de cumarina após jejum de oito horas. A urina dos voluntários foi coletada por um período de 24 horas. Para análise da amostra biológica, um método de screening de metabólitos rápido e facilmente executável por cromatografia líquida de ultra eficiência acoplada à espectrometria de massas de alta resolução foi desenvolvido. O pré-tratamento da amostra consistiu na ultracentifugação da urina por 15 minutos a 14000 rpm e a 4ºC seguida de filtração em filtro de poliéster (0,2 ?m) antes da injeção no cromatógrafo. Após aquisição dos dados, estes foram tratados com o auxílio do software MetaboLynx para a procura dos metabólitos oriundos da cumarina. Para que a confirmação estrutural pudesse ser realizada, os principais metabólitos encontrados passaram por um processo de isolamento e purificação através da coleta de picos cromatográficos, cromatografia em camada delgada e cromatografia em coluna. Foram encontrados 12 metabólitos, dos quais apenas quatro já haviam sido citados na literatura como parte do metabolismo humano da cumarina. Com o auxílio do software MetaboLynx, todas as biotransformações ocorridas na cumarina foram identificadas, porém, não foi possível confirmar por espectrometria de massas em quais locais da molécula as biotransformações ocorreram. Duas substâncias foram confirmadas pela comparação com padrão analítico (7-hidroxicumarina e ácido ohidroxifenilacético) e, com o auxílio da espectroscopia de ressonância magnética nuclear, as estruturas de dois metabólitos isômeros foram propostas: 7- hidroxicumarina glucoronida (sabidamente o principal metabólito da cumarina) e 5- hidroxicumarina glucoronida. Também foram encontrados dois isômeros hidroxilados e sulfatados da cumarina e dois isômeros di-hidroxilados e sulfatados. Outros metabólitos minoritários da cumarina também foram detectados. Não foi evidenciada a presença de cumarina livre ou do ácido o-cumárico na urina dos voluntários. O presente estudo mostrou que, apesar de a cumarina ser uma substância simples e já muito estudada, suas rotas de metabolização se encontravam incompletas. Isso nos levou à conclusão que o uso de ferramentas modernas é de extrema relevância para complementar o conhecimento do metabolismo de diversas drogas, especialmente porque os metabólitos ainda desconhecidos podem apresentar algum tipo de atividade biológica. Palavras-chave: cumarina, 7-hidroxicumarina, metabólitos, urina, excreção.pt_BR
dc.description.abstractAbstract: The purpose of this work was to qualitatively evaluate the excretory products of coumarin in the human urine. Five adult volunteers were enrolled in this study. Each one orally received a capsule containing 500 mg of coumarin after a fasting period of eight hours. The urine was collected for 24 hours. To analyze the biological sample and identify coumarin metabolites, a fast and easily executable screening method by ultra performance liquid chromatography coupled with high resolution mass spectrometry was developed. The sample pretreatment consisted in urine ultracentrifugation for 15 minutes (14000 rpm, 4ºC), followed filtration in polyester filter (0.2 ?m) before injection in the chromatograph. The acquired data were processed with MetaboLynx software to search for coumarin metabolites. To perform the structural confirmation, the major metabolites found have undergone an isolation and purification process through chromatographic peak collection, thin layer chromatography and column chromatography. Twelve metabolites were found, and only four had been previously described in the literature as part of the human metabolism of coumarin. With MetaboLynx software, all coumarin biotransformations were identified, however, it was not possible to confirm by mass spectrometry where in the molecule the biotransformation occurred. Two substances were confirmed by comparison to analytical standard (7-hydroxycoumarin and o-hydroxyphenylacetic acid) and, by nuclear magnetic resonance spectroscopy, the structures of two isomers metabolites were proposed: 7-hydroxycoumarin glucuronide (already know as the major metabolite of coumarin) and 5-hydroxycoumarin glucuronide. Two hydroxylated and sulfated coumarin isomers and two dihydroxylated and sulfated isomers were also found. Other minor coumarin metabolites were detected as well. Free coumarin or o-coumaric acid were not identified in volunteers' urine. This study showed that, although coumarin is a simple and well-studied substance, its metabolism routes were incomplete. This led us to the conclusion that the use of modern tools for drug metabolism identification is of extreme relevance, especially because the unknown metabolites can possess biological activity. Keywords: coumarin, 7-hydroxycoumarin, metabolites, urine, excretion.pt_BR
dc.format.extent82f. : il. algumas color., grafs., tabs.pt_BR
dc.format.mimetypeapplication/pdfpt_BR
dc.languagePortuguêspt_BR
dc.relationDisponível em formato digitalpt_BR
dc.subjectFarmáciapt_BR
dc.subjectDissertaçõespt_BR
dc.subjectFarmáciapt_BR
dc.subjectCiencias farmaceuticaspt_BR
dc.subjectCumarinaspt_BR
dc.subjectUrinapt_BR
dc.subjectExcreçãopt_BR
dc.titleAvaliação dos principais produtos de excreção da cumarina na urina de humanospt_BR
dc.typeDissertaçãopt_BR


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