Influência da suplementação pré-operatória com ácido graxo ômega-3 na cicatrização de anastomoses colônicas em ratos desnutridos que receberam paclitaxel

Abstract

Resumo: Introdução: A cicatrização das anastmoses em pacientes com câncer de ovário frequentemente se processa em ambiente de desnutrição e sob o efeito de quimioterápicos. Neste cenário o uso dos ácidos graxos ômega-3 têm sido propostos como elemento de reposição nutricional e como modulador do processo de cicatrização. Material e método: Foram estudados 160 ratos Wistar que foram divididos em dois grupos iguais. Um grupo foi submetido a desnutrição pelo processo de pair feending (D) por quatro semanas, durante as quais os ratos receberam metade da quantidade de comida do grupo controle. O outro grupo, nutrido (N), recebeu ração ad libitum. Na última semana, cada grupo foi subdividido em dois subgrupos que receberam, por gavagem, ácido graxo ômega-3 (O) na dosagem de 100 mg/kg ou azeite de oliva (A). Após este período, todos os animais foram submetidos a procedimento de colotomia em segmentos proximal e distal do cólon seguida de colorrafia. Após o procedimento cirúrgico cada subgrupo foi novamente subdivido em dois subgrupos que receberam salina (S) ou paclitaxel (P) na dose de 3,5 mg/kg intraperitonial. No quinto dia de pós-operatório os animais foram mortos. Foram avaliados dados evolutivos (peso, mortalidade, achados intraabdominais pós-morte). Os segmentos anastomóticos foram avaliados por meio da resistência a tração, parâmetros histológicos (hematoxilina-eosina, picro-sirius red) e parâmetros imunoistoquímicos, por meio dos marcadores CD 31 (contagem de vasos sanguíneos), ki-67 (células em proliferação) e calponina (miofibroblastos). Resultados: A mortalidade global foi de 26,8% sendo maior no grupo de animais que recebeu paclitaxel (p=0,003). Os animais submetidos a desnutrição pelo pair feeding apresentaram perda de peso em relação aos animais que receberam ração ad libitum (p<0,05). A incidência de estenose de anastomose foi maior no grupo de animais desnutridos em relação aos nutridos (p=0,007). A força de ruptura completa foi maior no grupo NAP em relação ao grupo DAP (1,2821 0,174 vs 0,7775 0,077; p<0,05). A média da intensidade do infiltrado inflamatório foi menor no grupo de DAS em relação ao grupo DOS (1,61 0,18 vs 2,50 0,16; p<0,05). O grupo NAS teve índice de maturação de colágeno (IMaC) médio maior que o grupo DAS (1,45 0,4 vs 0,35 0,08, p<0,05). O grupo NOS teve IMaC médio menor que o grupo DOS (2,08 0,35 vs 2,82 0,33, p<0,05). O grupo DAS teve IMaC médio menor que o grupo DOS (0,35 0,08 vs 2,82 0,33, p<0,05) e que o grupo DAP (0,35 0,08 vs 1,58 0,15, p<0,05). A contagem do número de vasos sanguíneos foi maior no grupo DAS em relação ao grupo DAP (12,64 1,7 vs 6,45 0,28; p<0,05) e menor no grupo DAP em relação ao grupo DOP (6,45 0,28 vs 8,91 0,88; p<0,05). Conclusão: A suplementação com ácido graxo ômega-3 associou-se ao aumento significativo na produção de colágeno maduro nos animais desnutridos, à reversão do efeito deletério causado pela desnutrição associada à administração do paclitaxel na força de ruptura e ao estímulo da neoangiogênese no grupo que recebeu paclitaxel. Palavras-chave: Anastomose colônica. Desnutrição. Ômega-3. Paclitaxel.

Abstract: Intoduction: The healing process of colonic anastomosis in patients with ovarian cancer often occurs in a condition of malnutrition and under the effect of chemotherapy. In this scenario, the use of -3 poli-unsaturated fatty acids ( -3 PUFA) has been proposed as nutrition element and as modulator of the cicatrization process. Material and methods: One hundred and sixty male Wistar rats were divided in two equal groups. The first group, malnourished (M), was submmited to a malnutrition process called pair feeding for a four-week period, in which animals have recieved half of the amount of food the control group received. The control group, well nourished (N), has received food ad libitum. During the last week of the fourweek period, each group of rats was divided in two subgroups that has received, via gavage, 100 mg/Kg of -3 PUFA (F) or olive oil (O). After this period, rats were submmited to colotomy surgery in two segments of the colon, proximal and distal, followed by colorraphy. Then each subgroup was divided again into two subgroups that have received intraperitouneously saline solution (S) or 3,5 mg/Kg paclitaxel (P). In the fifth day after surgery rats were killed. Weight, mortality and post-morten intraperitonious findings were evaluated daily during these five days after surgery. The clonic segments with anastomosis were evaluated by means of tensile strength, hitologic features, imunnohistochemical antibodies CD31 (blood vessels count), Ki67 (proliferating cells) and calponin (miofibroblsts). Results: The overall mortality tax was 26,8% being higher in the palcitaxel group (p=0,003). Animals submmited to a malnutrition process by pair feeding methodology lost more weight when compared with animals that have received food ad libitun (p<0,05). The incidence of anastomotic stenosis was higher in malnourished rats (p=0,007). The complete rupture strength (measured in Newtons) was higher in NOP group in relation to MOP group (1,2821 0,174 vs 0,7775 0,077; p<0,05). The average of inflamatory infiltrate intensity was lesser in MOS group when compared with MFS group (1,61 0,18 vs 2,50 0,16; p<0,05). The NOS group had mature collagen index (IMaC) higher than in MOS group (1,45 0,4 vs 0,35 0,08, p<0,05). This index was lesser in group NFS than in group MFS (2,08 0,35 vs 2,82 0,33, p<0,05) and lesser in group MOS than in groups MFS (0,35 0,08 vs 2,82 0,33, p<0,05) and MOP (0,35 0,08 vs 1,58 0,15, p<0,05).The blood vessels count was higher in MOS when compared with group MOP (12,64 1,7 vs 6,45 0,28; p<0,05) and lesser in group MOP when compared with group MFP (6,45 0,28 vs 8,91 0,88; p<0,05). Conclusion: The -3 PUFA supplementation was associated with increase in mature collagen production in malnourished animals, with revertion of deletrious effect of malnutrition associated with paclitaxel administration in rupture strenght and with neoangiogenesis stimulation in the paclitaxel group Keywords: Colonic anastomosis. Malnutrition. -3 PUFA. Paclitaxel.