Polimorfismos do gene Masp1 e concentração sérica de Masp-3 em pacientes infectados pelo HIV e coinfectados pelo HBV EHCV

Abstract

Resumo: A via das lectinas do sistema complemento é ativada na infecção pelo HIV por meio do reconhecimento de glicoproteínas do vírus por ficolinas e pela lectina ligante de manose (MBL), cujas variantes genéticas estão associadas com a susceptibilidade a infecções. As serinas proteases associadas a MBL, como MASP-1, MASP-3 e a proteína truncada MAp44, são codificadas pelo gene MASP1, que apresenta polimorfismos cujo papel na susceptibilidade a doenças ainda é desconhecido. Para verificar uma possível associação entre polimorfismos de MASP1 e concentração sérica de MASP-3 e a infecção pelo HIV, foram genotipados os polimorfismos rs72549262 (+57902 C>G) e rs1109452 (+58267 C>T), localizados na região não traduzida a 3’ no exon 12, por PCR-SSP biespecífica. Um total de 205 pacientes HIV+ e 210 controles foram estudados. Entre os acientes, 88 (43%) earm unicamente infectados pelo HIV, 12 (5,8%) infectados pelo HIV e HCV, 81 (40%) HIV+ e HBV+ e 17 (8,3%) eram triplamente infectados pelo HIV, HBV e HCV (7 indivíduos não foram avaliados para a infecção pelo HBV). As concentrações séricas de MASP-3 foram medidas por ELISA em 152 pacientes e 74 controles. Foram identificados três haplótipos: MASP1*CC, CT e GT, com frequências de 68,6%, 23,8% e 7,6% nos controles e 68,8%, 22% e 9,3% nos pacientes, respectivamente (P = n.s.). Não se observaram heterozigotos CC/GT em indivíduos HIV/HCV+ (P=0,0102 comparados a indivíduos HIV+HBV+HCV- e P=0,0294 comparados a indivíduos HIV+HCV-). Uma associação entre os genótipos contendo CT e GT e concentrações mais baixas de MASP-3 foi observada nos controles (16,14 em homozigotos CC/CC vs. 11,61 µg/mL nos demais, P=0,016). Concentrações elevadas de MASP-3, porém não os respectivos genótipos, foram associadas à susceptibilidade a infecção pelo HIV (22,16 µg/mL no total de pacientes vs. 14,37 µg/mL nos controles, P=0,0002). Esta associação permaneceu após regressão logística binária incluindo ou não os pacientes coinfectados (P<0,0001, OR=12,2 [IC95%= 3,95-37,67]) e P<0,0001, OR=12,95 [IC95%= 3,19- 52,65], respectivamente) e avaliando apenas pacientes HIV/HBV+ (P<0,0001, OR=8,79 [IC95%=2,79-27,66]), independentemente de idade, gênero e grupo étnico. As concentrações de MASP-3 foram ainda mais elevadas nos pacientes HIV+HBV+HCV+ (P=0,031 no modelo reduzido de regressão). Contudo, as concentrações de MASP-3 não se correlacionaram com a carga viral ou com a contagem de células TCD4 nos pacientes HIV+. Os resultados levam-nos a sugerir que as concentrações basais de MASP-3 são influenciadas por polimorfismos do gene MASP1 e que genótipos heterozigotos MASP1*CC/GT podem conferir resistência à infecção pelo HCV. Por outro lado, concentrações elevadas de MASP- 3 estão fortemente associadas à infecção pelo HIV e a coinfecção HBV/HCV, independentemente dos genótipos associados.

Abstract: The lectin pathway of complement is activated through the recognition of HIV glycoproteins by ficolins and mannose-binding lectin (MBL), whose genetic variants are associated with the susceptibility to HIV infection. Serine proteases associated with MBL, such as MASP-1, MASP-3 and the truncated MAp44 protein are encoded by MASP1 gene, which is polymorphic but it’s role in disease susceptibility is still unknown. In order to verify a possible association between MASP1 polymorphism and HIV infection, the variants rs72549262 (+57902 C>G) and rs1109452 (+58267 C>T), located in the 3' untranslated region of exon12, were genotyped by bispecific PCR-SSP. A total of 210 controls and 205 HIV patients (88/43% only infected by HIV, 12/ 5.8% HIV+ and HCV+, 81/40% HIV+ and HBV+ and 17/ 8.3% HIV+, HBV+ and HCV+) (7 individuals were not evaluated for HBV infection). Serum concentration of MASP-3 was measured by ELISA in 152 HIV patients and 74 controls. Three haplotypes were identified: MASP1*CC, CT and GT, with frequencies 68.6%, 23.8% and 7.6% in the controls (in Hardy-Weinberg equilibrium) and 68.8%, 22% and 9.3% in the patients, respectively. There were no CC/GT heterozygotes among HIV+/HCV+ patients (Fisher’s exact test P=0.0102 compared with HIV+HBV+HCV- and P=0.0294 compared with HIV+HCV-). In the controls an association between genotypes with CT and GT and low MASP-3 concentrations was observed (16.14 µg/mL in CC/CC homozygotes vs. 11.61 µg/mL in the other genotypes, Mann-Whitney P=0.016). Higher MASP-3 levels, but not the corresponding genotypes, were associated with HIV infection (22.16 in all patients vs. 14.37 µg/mL in the controls, Mann-Whitney P=0.0002). This association remained after binary logistic regression including or not coinfected patients (P<0.0001, OR=12.2 [CI95%=3.95-37.67]) and P<0.0001, OR=12.95 [CI95%=3.19- 52.65], respectively) and evaluating only HIV+/HBV+ (P<0.0001, OR=8.79 [CI95%=2.79-27.66]), independently of age, gender and ethnic group. MASP-3 concentrations were even higher in the HIV+/HBV+/HCV+ (P=0.031 in the reduced regression model). Nevertheless, MASP-3 concentrations were not correlated with viral load or CD4+ T cell counts in HIV+ patients. These results lead us to suggest that basal MASP-3 concentrations are influenced by MASP1 gene polymorphisms and that MASP1*CC/GT heterozygotes are protective against HCV infection in HIV patients. On the other hand, higher concentrations of MASP-3 were strongly associated with HIV infection and HBV/HCV coinfections, independently of the associated genotypes.