Produtos finais de glicação avançada fluorescentes (AGEs-F) e polimorfismos dos genes MIF, MTNR1B e CDKAL1 no diabetes gestacional

Abstract

Resumo: O Diabetes mellitus gestacional (DMG) é uma patologia que afeta cerca de 7% das gestações e está associado à múltiplas complicações para a gestante e para o feto. O diagnóstico precoce e o tratamento do DMG minimizam a morbimortalidade associada à patologia. O objetivo do trabalho foi avaliar polimorfismos de único nucleotídeo (SNPs) nos genes MIF (fator inibidor da migração de macrófago; rs1007888), MTNR1B (receptor de melatonina 1B; rs10830963) e CDKAL1 (quinase 1 dependente de ciclina; rs7754840) e a associação destes polimorfismos com biomarcadores de controle glicêmico, função renal, perfil lipídico e com os produtos de glicação avançada fluorescentes (AGEs-F) em um estudo do tipo caso-controle. Foram estudadas 442 gestantes Euro-Brasileiras, não relacionadas, sendo 225 gestantes com diabetes gestacional (grupo DMG) e 217 gestantes saudáveis (grupo controle) caracterizadas segundo os critérios da Associação Americana de Diabetes (2010). Os AGEs-F foram quantificados em espectrofluorímetro de placa. As genotipagens dos polimorfismos selecionados para o estudo foram realizadas pela metodologia de sondas fluorescentes (Taqman®). O projeto teve aprovação do Comitê de Ética da UFPR (CAAE09664412.4.0000.0101). Gestantes com DMG apresentaram idade, peso, e índice de massa corporal (IMC) significativamente maiores (P<0,05) quando comparado ao grupo controle. As concentrações séricas da glicemia em jejum, colesterol total, LDL-colesterol, triglicerídeos e ácido úrico foram significativamente maiores no grupo DMG. No entanto, o grupo controle apresentou concentrações séricas significativamente maiores quanto à uréia, creatinina, proteínas totais e albumina. As concentrações séricas dos AGEs-F não apresentaram diferença significativa entre os grupos e foram correlacionadas positiva e significativamente (r=0,421; P<0,001) com a creatininemia no grupo DMG. As concentrações séricas de AGEs-F também não foram diferentes (P>0,05) em quatro períodos gestacionais distintos (12-23; 24-28, 29-32 e >32 semanas) sugerindo que este biomarcador é pouco influenciado pelas alterações fisiológicas associadas à gestação ou ao DMG. Todos os polimorfismos em estudo estão no equilíbrio de Hardy-Weinberg. Para o grupo controle, os alelos de menor frequência apresentaram, respectivamente, 46,8% (95%IC 41-52) para o rs1007888; 20,2 (95%IC 16-24) para o rs10830963 e 28,0% (95%IC, 23-33) para o rs7754840 dos genes MIF, MTNR1B e CDKAL1. Os polimorfismos rs1007888 e rs7754840, respectivamente, nos genes MIF e CDKAL1, não foram associados ao DMG. O polimorfismo rs10830963 do gene MTNR1B foi associado à concentração sérica de LDL-colesterol no grupo DMG. No grupo DMG, portadoras do alelo de risco G em homozigose (GG) apresentaram concentração de LDL-colesterol, um marcador para risco cardiovascular, cerca de 20 mg/dL maior do que as portadoras do genótipo CC. As frequências alélicas e genotípicas do polimorfismo rs10830963 do gene MTNR1B diferiram significativamente (P<0,05) entre os grupos em estudo, sendo associadas ao diabetes gestacional. Portadoras do alelo de risco (G) do rs10830963 apresentaram cerca de 1,4 vezes (OR; 95%IC, 1,02-2,02) mais chance em desenvolver DMG quando comparadas às portadoras do alelo C. Em síntese, o polimorfismo rs10830963 do gene MTNR1B está associado ao DMG e a concentração sérica de AGEs-F não apresenta sensibilidade como biomarcador para esta patologia.

Abstract: Gestational Diabetes Mellitus (GDM) is a condition that affects about 7 % of pregnancies and is associated with multiple complications for the mother and the fetus. Early diagnosis and treatment of GDM minimize the morbidity and mortality associated with this disease. The objective of this study was to evaluate single nucleotide polymorphisms (SNPs) in genes MIF (macrophage migration inhibitory factor; rs1007888), MTNR1B (melatonin receptor 1B; rs10830963) and CDKAL1 (cyclin dependent kinase1; rs7754840) and their association with biomarkers of glycemic control, renal function, lipid profile and the fluorescent advanced glycation end products (F-AGEs) in a study of the case-control type. Were studied 442 unrelated Euro-Brazilian pregnant women and the subjects were classified as healthy pregnant women (control, n=217) and gestational diabetic patients (GDM, n=225) according to the American Diabetes Association criteria (2010). F-AGEs were measured in the spectrofluorimeter plate. The genotyping of the three polymorphisms were performed by the method of fluorescent probes (Taqman®). The project was approved by the Ethics Committee UFPR (CAAE09664412.4.0000.0101). Pregnant women with GDM presented age, weight, and body mass index (BMI) significantly (P<0.05) higher compared to the control group. Serum concentrations of fasting glucose, total cholesterol, LDL- cholesterol, triglycerides and uric acid of the GDM group were also significantly higher than control group. However, the control group had significantly higher serum concentrations of urea, creatinine, total protein and albumin than GDM group. Serum concentrations of F-AGEs showed no significant difference between the groups and were correlated positively and significantly (r = 0.421, P< 0.001) with serum creatinine in DMG group. Serum concentrations of F-AGEs were not different (P > 0.05) in four different gestational periods (12-23, 24-28, 29-32 and >32 weeks), suggesting that this biomarker is little influenced by physiological changes associated with pregnancy or gestational diabetes. The studied variants were in the Hardy-Weinberg equilibrium. For the control group, the frequency of minor alleles frequency showed, respectively, 46.8% (95% CI 41-52) for rs1007888, 20.2 (95% CI 16-24) for rs10830963 and 28.0% (95% CI 23-33) for rs7754840 in the MIF, MTNR1B and CDKAL1. The rs1007888 and rs7754840 polymorphisms, respectively, in the MIF and CDKAL1 genes were not associated with GDM. The rs10830963 polymorphism in the gene MTNR1B was associated with serum LDL-cholesterol in the GDM group. In the DMG group, carrying the risk allele in homozygous G (GG) had LDL-cholesterol as a marker for cardiovascular risk, about 20 mg/dL higher than the carrier genotype CC Allele. The genotype frequencies of the rs10830963 polymorphism of the MTNR1B gene differed significantly (P<0.05) between the study groups, being associated with gestational diabetes. Carriers of the risk allele (G) of rs10830963 showed 1.4 times (OR, 95% CI, 1.02 to 2.02) chance to develop gestational diabetes when compared to the allele C. In summary, rs10830963 polymorphism of the gene MTNR1B is associated with DMG and serum F-AGEs shows no sensitivity as a biomarker for this disease.