dc.contributor.advisor | Strottmann, Daisy Maria | pt_BR |
dc.contributor.author | Pietrobon, Anna Julia | pt_BR |
dc.contributor.other | Santos, Claudia Nunes Duarte dos | pt_BR |
dc.contributor.other | Zanata, Silvio Marques, 1974- | pt_BR |
dc.contributor.other | Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Curso de Graduação em Ciências Biológicas | pt_BR |
dc.date.accessioned | 2022-08-18T16:52:40Z | |
dc.date.available | 2022-08-18T16:52:40Z | |
dc.date.issued | 2014 | pt_BR |
dc.identifier.uri | https://hdl.handle.net/1884/35689 | |
dc.description | Orientador: Daisy Maria Strottmann | pt_BR |
dc.description | Coorientadores: Claudia N. D. dos Santos e Silvio Marques Zanata | pt_BR |
dc.description | Monografia (Bacharelado) - Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Curso de Graduação em Ciências Biológicas | pt_BR |
dc.description.abstract | Resumo : A dengue atualmente constitui um dos principais problemas de saúde pública nas regiões tropicais e subtropicais. Apesar dos grandes avanços dos últimos anos para o entendimento da biologia do vírus da dengue (DENV), a patogenia da doença continua sendo um grande desafio. Estudos de infecção em modelo murino identificaram variantes de alta virulência em dengue vírus tipo 1 (DENV-1) que apresentam mutações nas proteínas E e NS3. As mutações na proteína NS3 encontram-se nos resíduos Val209Ile, Leu435Ser e Leu480Ser do domínio helicase. Recentemente, estudos do nosso grupo demonstraram que as mutações Leu435Ser e Leu480Ser aumentam a capacidade replicativa do DENV-1 in vivo, in vitro e ex vivo, enquanto a mutação Val209Ile parece não alterar a atividade biológica do vírus. Os mecanismos pelos quais as mutações modulam a virulência do vírus ainda não foram completamente compreendidos. A proteína NS3 é uma proteína multifuncional que, juntamente com a proteína NS5, desempenha papel crítico durante a replicação do genoma viral. Buscando um melhor entendimento dos mecanismos funcionais relacionados às mutações, o presente estudo visou expressar e purificar as proteínas NS3hel parental do DENV-1 e suas variantes a fim de avaliar o efeito das mutações pontuais na atividade de ATPase da proteína. Além disso, procuramos expressar o domínio NS5RdRp da proteína NS5 para estudos futuros de interação com a proteína NS3hel. Nossos dados revelam que as mutações em estudo conferem maior afinidade da proteína pelo substrato e maior eficiência catalítica quando comparadas com a proteína parental. Os resultados sugerem ainda que a atividade helicase da proteína NS3hel é estimulada pela molécula de dupla fita de RNA. Pelos métodos empregados neste estudo, não foi possível expressar de forma funcional a proteína recombinante NS5RdRp. No entanto, sob condições desnaturantes a proteína foi purificada e poderá ser utilizada para o desenvolvimento de anticorpos monoclonais, que contribuirão para estudos futuros. Os dados obtidos sobre a atividade ATPase da proteína NS3hel são indicativos de que mutações pontuais podem modular a eficiência catalítica da enzima e modificar a aptidão viral para suportar a infecção do DENV-1 em diferentes modelos de estudo. Tais informações são importantes para o entendimento dos mecanismos moleculares envolvidos na patogênese da dengue, os quais são fundamentais no contexto de produção de vacinas efetivas e delineamento de estratégias antivirais | pt_BR |
dc.format.extent | 1 recurso online : PDF. | pt_BR |
dc.format.mimetype | application/pdf | pt_BR |
dc.language | Português | pt_BR |
dc.relation.requires | Exigências do sistema: Adobe Acrobat Reader | pt_BR |
dc.subject | Dengue | pt_BR |
dc.subject | Proteínas | pt_BR |
dc.title | Caracterização funcional de mutantes da proteína NS3hel do vírus da dengue e expressão do domínio RdRp da proteína NS5 para estudos de interação | pt_BR |
dc.type | Monografia Graduação Digital | pt_BR |