Citoquímica ultraestrutural de enzimas em macrófagos tratados com o medicamento homeopático método Canova®

Abstract

Resumo : Macrófagos são células do sistema imune, pertencentes ao Sistema Mononuclear Fagocftico, as quais apresentam uma série de funções relacionadas principalmente com a defesa do organismo. A enzima Mg++ATPase é uma enzima presente na membrana plasmática, responsável pelo transporte do íon Mg ++ na célula. Este é utilizado como cofator em diversas vias metabólicas, como por exemplo a glicólise, neoglicogênese e síntese protéica. A fosfatase ácida é uma enzima marcadora de lisossomos. Estes desempenham a função de digerir material proveniente de fora da célula (heterofagia) e de substâncias próprias das células (autofagia), interferindo diretamente no processo de defesa do organismo. O Método Canova® é um medicamento homeopático indicado em diversas doenças com alterações no sistema imunológico. Experimentos prévios realizados demonstraram alterações morfológicas e bioquímicas em macrófagos peritoneais de camundongos e alveolares humanos, tratados com o Método Canova®. O objetivo deste trabalho é detectar possíveis alterações da enzima fosfatase ácida e da Mg++ATPase em macrófagos peritoneais de camundongos. Foram realizados experimentos in vitra, onde estas células foram plaqueadas e mantidas a 37°C e 5% C02 durante 48 horas. Estabeleceram-se grupos tratados com o medicamento e grupos controles: sem o medicamento e outros sem o substrato da enzima. Nos grupos tratados foi adicionado ao meio de cultura 10% de Método Canova® e após 24 horas mais 1 %. As células foram então processadas segundo o protocolo rotineiro das respectivas enzimas. Após a incubação, as células foram processadas e observadas no microscópio eletrônico de transmissão Jeol 1200 EXII, no Centro de Microscopia Eletrônica da UFPR. Tanto na fosfatase ácida, assim como na Mg++ATPase, o grupo tratado obteve uma marcação eletrondensa positiva mais intensa nos macrófagos peritoneais dos camundongos tratados com o Método Canova® que no grupo controle. Na Mg++ATPase a marcação foi observada principalmente na membrana plasmática. Na fosfatase ácida, a marcação foi observada principalmente na membrana dos lisossomos, vacúolos citoplasmáticos, envoltório nuclear e membrana plasmática. A diferença na intensidade de marcação entre os grupos, pode significar que reações metabólicas envolvendo estas enzimas ocorram em maior quantidade nos macrófagos tratados com o Método Canova®.