Teratogênese e estresse oxidativo em embriões de Gallusgallus expostos ao cádmio

Abstract

Resumo : O cádmio(Cd) é um metal tóxico, capaz de causar efeitos adversos em uma ampla variedade de animais, incluindo embriões de aves. Estes são empregados como modelo na toxicologia, pois são muito sensíveis à ação de contaminantes. Porém, há poucos estudos sobre seus efeitos nos estádios iniciais de desenvolvimento. Além disso, a investigação do estresse oxidativo induzido pelo contaminante também mostra-se útil na determinação dos efeitos tóxicos do cádmio em embriões de ave. O objetivo do presente trabalho foi avaliar em embriões de ave com 3 e 7 dias de desenvolvimento os efeitos na morfologia e estresse oxidativo da exposição ao cloreto de cádmio (CdCl2) em duas concentrações. Os ovos foram divididos em 3 grupos e expostos através da injeção, na câmera de ar do ovo, de 100 µl de CdCl2 a 5 µM e a 50 µM. O grupo controle foi injetado com solução salina tamponada com fosfato (PBS). Após a exposição, os ovos foram incubados durante 3 e 7 dias. Para as análises morfológicas os embriões de 3 dias foram fixados, corados, montados em lâmina e analisados em estereomicroscópio, os de 7 dias foram fixados, lavados e fotografados para posteriores análises. Os resultados demonstraram que o cádmio não induz a mortalidade dos embriões nem promove atrasos no desenvolvimento para essas doses e tempo analisadas, porém é capaz de promover efeitos teratogênicos, causando, principalmente, malformações como falhas no fechamento da parede do corpo e alterações cefálicas. Nos grupos contaminados na menor dose foram encontrados mais indivíduos malformados e embriões com 7 dias apresentaram mais variações de malformações. Para as análises bioquímicas, após a coleta os embriões foram lavados com PBS e armazenados a -80 °C. Posteriormente, foram homogeneizados, e o homogenato centrifugado e aliquotado. A concentração de proteínas foi determinada pelo método BRADFORD (1976) e serviu de base para as padronizações. A análise de concentração de tióis não proteicos e glutationa (GSH) demonstrou que esse não é um sistema relacionado com a toxicidade do Cd. A análise daperoxidação lipídica (LPO) para embriões com 3 dias indica um aumento das defesas para a LPO, ou uma falha nos processos geradores da LPO induzido pelo Cd. Para embriões com 7 dias essa análise não demonstrou diferença significativa. Comparando os valores em embriões com 3 e 7 dias foi observado que aLPO aumenta com o tempo de incubação. A análise da concentração de carbonilas(PCO) indica que o cádmio promove efeitos tóxicos e danos a proteínas. A enzima catalase(CAT) não pode ser mensurada em embriões com 3 dias, porém foi detectável em embriões com 7, demonstrando que esse sistema antioxidante está em processo de desenvolvimento e embriões mais jovens são mais sensíveis ao estresse oxidativo. Esses resultados indicam que o cádmio tem efeito teratogênico já nos estádios iniciais de desenvolvimento, além de induzir estresse oxidativo em embriões de galinha contaminados, nos tempos e concentrações utilizados nesse trabalho.