Verificação da potência de extratos alergênicos e da exposição a alérgenos domiciliares : contribuição ao tratamento de doenças alérgicas

Abstract

Resumo: 0 controle das doenças alergicas inclui o conhecimento dos aeroalergenos e o uso da imunoterapia na tentativa de modificar a resposta imunol6gica dos pacientes aos mesmos. Os objetivos deste estudo foram: verificar a potencia in vivo e in vitro de extratos alergenicos comerciais de Dermatophagoides pteronyssinus (Dp) para imunoterapia e o grau de sensibilizat;ao e exposit;ao de pacientes at6picos a alergenos domiciliares. Os alergenos Der p I e Der p 2 foram quantificados por ELISA em extratos alergenicos para imunoterapia. Os extratos foram avaliados por testes cutfmeos de leitura imediata por puntura (TCA), cujo instrumento e variabilidade foram previamente avaliados. Pacientes alergicos ao Dp (n=21 0) e individuos nao alergicos (n=31) foram submetidos a TCA em seis servi<;:os de alergia. A intensidade das rea<;:oes foi aferida pelo diametro medio das papulas e dos eritemas, em leitura ap6s 15 minutos. Os alergenos Der p l, Der f 1, Der p 2, B Ia g l, Can f 1 e F el d 1 foram quantificados por ELISA em amostras de poeira domiciliar de 51 pacientes alergicos ao Dp. Estes foram submetidos a TCA para alergenos domiciliares e determinat;ao dos niveis sericos de IgE total e especifica ao Dp por fluorescencia enzimatica (UniCAP). Os niveis dos alergenos Der p 1 ou Der p 2 foram indetectaveis ou muito baixos (0,02 a 0,58 f.lg/ml) na maioria dos extratos, exceto em urn deles (c6digo I; 68,3 e 31 ,7f.lg/ml, respectivamente). Em 210 at6picos foi avaliado o diametro medio das papulas. As papulas foram < 2 mm (0,36 a 1,95 mm) com sete extratos, mas como extrato I a media das papulas foi 7,1 mm de diametro. A positividade dos testes (papula 2:: 3 mm) com os sete extratos variou de 2 a 36%, sendo detectada diferen<;:a significativa entre os resultados de cada servi<;:o envolvido. 0 extrato I teve positividade de 97,2% sem haver diferenc;:a significativa entre os resultados de cada servic;o. Os maiores niveis dos alergenos de acaros (grupos 1 e 2) foram detectados em amostras das camas (MG=30,2 e 15,2 f.lg/g, respectivamente), seguidas pela sala de TV, piso do quarto e cozinha. Os niveis de alergenos do grupo 1 e 2 foram 2:: 2 ~tg/g de poeira em todas as amostras de camas. Niveis de alergenos do grupo 1 e 2 2:: 10 f.lg/g foram observados, respectivamente, em 46/51 (90%) e 35/51 (69%) destas amostras. Niveis de alergenos de barata (Bla g 1) >2UIIg foram detectados ao menos em urn local coletado em 11 (22%) dos 51 domicilios, mais freqiientemente na cozinha e sala de TV. Os maio res niveis de alergenos de caes e gatos foram detectados nas casas com animais. Niveis baixos destes alergenos, no entanto, foram tambem encontrados em ambientes domiciliares sem a presenc;a de animais. Todos os pacientes apresentaram positividade ao TCA para acaros da poeira domiciliar. Os niveis de IgE total (MG=630, 4 UI/ml) e especifica para Dp (MG=40,2 Ul/ml) estavam elevados e apresentaram correla<;:ao entre si. Concluiu-se que a maioria dos extratos alergenicos testados in vitro e in vivo nao contem os alergenos principais do Dp em quantidades recomendaveis para imunoterapia. Pacientes at6picos de Curitiba sao expostos a altos niveis de,alergenos de acaros, especialmente Dp, que predominam nas amostras de cama. Outros alergenos, com menor freqiiencia, podem ser encontrados em niveis de sensibilizaçao.

Abstract: The control o f allergic diseases includes the knowledge o f the aeroallergens and use of immunotherapy in the attempt o f modifying immunologic reactions to them. The aims o f this study were to verify the in vitro and in vivo potency o f commercial allergenic extracts of Dennatophagoid.es pteronyssinus (Dp) for immunotherapy and the sensitization degree and exposure levels of atopic patients to indoor allergens. The allergens Der p 1 and Der p 2 were quantified in allergenic extracts for immunotherapy by the ELISA method. The extracts were evaluated for skin prick test (SPT) whose disposable devices and variability were previously appraised. For that, six allergy centers submitted allergic patients to Dp (n=210) and non allergic individuals (n=31) to TCA. Reading was done after 15 minutes and the skin reactivity was determined by the mean diameters o f wheals and flares. The allergens Der p 1, Der f 1, Der p 2, Bla g 1, Can f 1 and Fel d 1 were quantified by ELISA in house dust samples o f 51 patients allergic to Dp. These patients were skin prick tested to other inhalant allergens and serum levels o f total and specific IgE to Dp were determined by fluoroenzymeimmunoassay (UniCAP). Der p 1 and Der p 2 allergen levels were indetectable or very low (average 0.02 to 0.58 [ig/ml) in most o f the extracts, except in one o f them (code I; 68.3 and 31.7 |ag/ml, respectively). In 210 atopic patients the mean wheal diameters were evaluated. The wheals were <2 mm (average 0.36 to 1.95 mm) with seven extracts, but a mean wheal diameter o f 7.1 mm with extract I. The frequency o f the positive SPT (wheal > 3 mm) with seven extracts varied from 2 to 36%, and significant difference were observed among observers of participating centers. SPT with the extract I gave 97.2% positive reactions with similar frequency obtained in different centers. The highest allergen levels were detected to house dust mite allergens (groups 1 and 2) especially in dust samples from beds (geometric means=30.2 and 15.2 jug/g, respectively), followed by samples from living room, bedroom floor and kitchen. Levels o f group 1 and 2 allergens were > 2 (ig/g o f dust in all samples from beds. Levels o f these allergens > 10 |ig/g o f dust were observed, respectively, in 46/51 (90%) and 35/51 (69%) o f those samples. Levels o f cockroach allergen (Bla g 1) >2UI/g were detected at least in one sample in 11 (22%) houses, more frequently in kitchen and living room. The highest dog and cat allergen levels were detected in houses with animals. However, low levels o f these allergens were also found in houses without animals. All patients had positive SPT to house dust mites. The total (GM=630.4 kU/ml) and specific IgE for Dp (GM=40.2 kU/ml) levels were increased and correlated to each other. We concluded that most o f the allergenic extracts tested in vitro and in vivo did not have enough amounts o f the main allergens o f Dp for immunotherapy. Allergic patients in Curitiba are exposed to high dust mite allergen levels, especially Dp, that prevails in beds. Other allergens could be found less frequently at sensitization levels.