Composição fitoquímica de cascas de Persea major (MEISN.) L. E. KOPP (Lauraceae), desenvolvimento e avaliação preliminar de formas farmacêuticas para uso tópico

Abstract

Resumo

Resumo: A família Lauraceae é composta de 52 gêneros e cerca de 3000 espécies, sendo a maioria dessas, lenhosas. As cascas do lenho de Persea major (Meisn.) L.E.Kopp, são usadas pela população em lesões, inflamações cutâneas e distúrbios gástricos, apresentando caráter mucilaginoso e ação cicatrizante. Poucos estudos existem na identificação química e aplicação cutânea da espécie, conhecida popularmente como pau-andrade e abacate-bravo, entre outros. Essa pesquisa focou-se na identificação da composição glicídica e fenólica de cascas da espécie; envolvidas na cicatrização; em conjunto com o desenvolvimento e avaliação preliminar de diferentes formulações para uso tópico com incorporação do extrato liofilizado. Foram detectados, na casca do lenho seca e estabilizada, aminogrupos, esteróides/triterpenos, taninos, saponinas e açúcares totais. Em relação à composição fenólica, o resultado obtido foi de 1,27 g%. Na determinação de taninos totais obteve-se a concentração de 3,41 g% utilizando o reagente Folin-Denis, e 0,66 g% com o reativo Folin-Ciocalteau; ambos expressos em equivalentes de pirogalol; evidenciando-se a interferência desses reagentes na análise espectrométrica. Por meio de extrações aquosas e alcalinas detectou-se concentração igual ou superior a 50% de açúcares totais, por espectrometria. Desses no extrato aquoso prevaleceram os monossacarídeos arabinose e xilose, sendo encontrados na provável estrutura de arabinoxilana, polissacarídeo já relatado no gênero Persea. Nos extratos alcalinos foram detectados em geral xilose, arabinose e glucose, provavelmente presentes como xilana, arabinoxilana e arabinoglucana no material vegetal; analisados por Cromatografia Gasosa. Ácidos Urônicos foram detectados por espectrometria, em maior quantidade na fração aquosa. Todas as amostras analisadas foram consideradas heterogêneas, por meio da análise de Cromatografia de Exclusão Molecular de Alta Resolução. Na determinação de proteínas totais os percentuais obtidos foram baixos para todas as frações extrativas. Foram produzidas formulações em pomada, creme e gel, as quais devem ser melhoradas para obtenção de melhor homogeneidade e maior estabilidade de pH. Na avaliação preliminar apenas a embalagem de alumínio foi considerada satisfatória, podendo ser um possível sistema de embalagem para as formulações desenvolvidas.

Abstract: Malva is the popular name of Malva sylvestris, herb medicinal used for treatment of oral disease, due to anti-inflammatory action. The growth of phytotherapy in Brazil is due to the implementation of government program called Politica Nacional de Plantas Medicinais e Fitoterápicos. Many species of plants that are available to the population are present in list RENISUS, between them, M. sylvestris. Considering the new legislation of register for herbal medicines in Brazil, becomes necessary to deepen the knowledge about plants with therapeutic use, define this responsible metabolite and the amount found in the species to ensure the quality of the herbal medicine. Therefore, was defined as objective of the work to development and validation of analytical quantitative method for metabolites of M. sylvestris species by HPLC-DAD. Moreover, there is no reported assay method for malva metabolites in Brazilian pharmacopoeia 4th edition monograph. Between the metabolites reported in this species are flavonoid, phenolic compound, coumarins and antocyanidin. The quantified metabolites had been: caffeic acid, scopoletin and ferulic acid. The chromatographic method was defined and validated with column C18 XBridge (4,6 x 150 mm; 5 ?m), column guard C18 XBridge (4,6 x 20 mm; 5 ?m), temperature 25?C, system of mobile phase: A - 10% (v/v) formic acid solution, B - methanol/formic acid (90:10, v/v) and D - acetonitrila, at a flow rate 0,8 mL/min gradient elution mode, the detection wavelength was set as 348 nm and the injection volume of 5?L. The dry extract samples (M50, M70, M80, M90, M100, S70 and T70) had been weighed and diluted in (9:1, v/v) methanol/water solution the concentration of 20 mg/mL and filtered in 0,45 ?m, and the glycolic extract samples (EC1, EC2, EC3, EC4, EC5, EC6, EC7 and EC8) only had been filtered in 0,45 ?m. The S70 extract was what presented greater concentration of caffeic acid (17.46 ?g/mg), scopoletin (8.09 ?g/mg) and ferulic acid (15.32 ?g/mg). The M50 extract presented high er concentration of scopoletin (4.52 ?g/mg). Between the commercial extracts, EC6 and EC7 presented greater concentration of the metabolites. Comparative analysis of the extracts was carried through by TLC, RMN of 1H, HPLC-DAD and HPLC-EM associated the PCA. The results had demonstrated that variations of ethanol/water ratio in the maceration affect polar compounds extraction. Higher amounts of water extracted more compounds. Comparing the different methods of extraction turbo extraction was better method followed by maceration and soxhlet. The method developed has provided a efficient for the characterization and quantification of three M. sylvestris's metabolites. Furthermore, quality control analysis of commercial extracts can apply this method as routine, contributing to quality of medicines products that will countains of malva extract in its composition.