Caracterização do gene cyp2d15 em canídeos domésticos e selvagens

Abstract

Resumo: A superfamília do citocromo P450 (P450s) de hemoproteínas é constituída por aproximadamente 500 membros distribuídos entre mais de 70 subfamílias encontradas em eucariotos e procariotos. O gene cyp2d15, ortólogo ao CYP2D6 humano, participa do metabolismo de mais de trinta drogas comercialmente disponíveis além de uma série de xenobióticos ambientais. Várias P450 humanas apresentam expressão polimórfica, principalmente a CYP2D6. Este polimorfismo é primariamente caracterizado por dois fenótipos: indivíduos com a atividade normal da CYP2D6 (metabolizadores rápidos) e indivíduos com diminuição essa atividade (metabolizadores lentos). Os modelos animais são muito utilizados no desenvolvimento pré-clínico de medicamentos a fim de prever o comportamento metabólico de novos compostos em humanos. Apesar dos membros da família do citocromo 450 possuírem seqüências altamente conservadas entre as espécies, ou seja, há relativamente poucas diferenças na seqüência primária de aminoácidos, até mesmo essas pequenas diferenças podem dar origem a mudanças significativas na especificidade do substrato e na atividade catalítica dessas enzimas, podendo levar também à ativação de procarcinógenos e à ormação de metabolitos tóxicos. O presente estudo contém uma revisão bibliográfica sobre o papel do gene do biometabolismo cyp2d15 e dois capítulos: o primeiro com a caracterização do gene em canídeos domésticos de diferentes raças e o segundo com a caracterização do gene em canídeos selvagens cativos sul-americanos. No primeiro capítulo a caracterização do gene cyp2d15 em 21 raças caninas onde oito xons foram analisados, revelou cinco SNPs distribuídos em três dos seis exons selecionados. Um total de 1.269 pb de seqüências codificadoras foram reseqüenciadas rendendo uma freqüência média de um SNP para cada 254 pb (1/254). Um total de quatro nsSNPs, os quais podem estar envolvidos na alteração da função protéica foram detectados. No capítulo II a caracterização do gene cyp2d15 em quatro diferentes espécies de canídeos selvagens cativos sul-americanos (Cerdocyon thous, Lycalopex gymnocercus, Speothos venaticuse Chrysocyon brachyurus), revelou oito SNPs distribuídos nos quatro exons elecionados.Um total de 771 pb de seqüências codificadoras foram reseqüenciadas rendendo uma freqüência média de um SNP para cada 96 pb (1/96). Um nsSNP, que pode estar envolvido na alteração da função protéica foi detectado. Com base nestes resultados, destaca-se a imp rtância de novos estudos que caracterizem os polimorfismos genéticos no gene cyp2d15 em canídeos domésticos e selvagens, devido à ausência destes dados na literatura corrente e da potencial importância em estudos pré-clínicos.