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dc.contributor.advisorNakao, Lia Sumiept_BR
dc.contributor.authorCriminacio, Ciro Rafaelpt_BR
dc.contributor.otherZanata, Silvio Marquespt_BR
dc.contributor.otherUniversidade Federal do Paraná. Setor de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e Molecularpt_BR
dc.date.accessioned2018-04-20T20:02:12Z
dc.date.available2018-04-20T20:02:12Z
dc.date.issued2007pt_BR
dc.identifier.urihttp://hdl.handle.net/1884/13906
dc.descriptionOrientadora : Profª Drª Lia Sumie Nakaopt_BR
dc.descriptionCo-orientador : Prof. Dr. Silio Marques Zanatapt_BR
dc.descriptionDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e Molecular. Defesa: Curitiba, 2007pt_BR
dc.descriptionInclui bibliografiapt_BR
dc.description.abstractSulfidril oxidases são enzimas que catalisam a formação de dissulfetos em peptídeos e proteínas com a redução do oxigênio molecular para peróxido de hidrogênio. Duas famílias de sulfidril oxidases dependentes de FAD foram descritas até agora: a família QSOX (quiescina sulfidril oxidase) e a família ERV/ALR (essential for respiration and vegetative growth/augmenter of liver regeneration). Os membros da família QSOX compartilham seqüências semelhantes e seqüências de aminoácidos características. Estas enzimas possuem um domínio N-terminal tiorredoxina-PDI (proteína dissulfeto isomerase) e um domínio C-terminal ERV com o sitio de ligação de FAD. A família QSOX inclui a quiescina humana de fibroblasto de pulmão e as sulfidril oxidases de clara de ovo de galinha, vesícula seminal de rato, células endometriais de porcos da índia e epiderme de rato. As QSOX parecem ser essenciais em algumas funções celulares como no dobramento de proteínas, elaboração da matriz extracelular, regulação do estado redox e no controle do ciclo celular. Este trabalho teve como objetivo expressar a QSOX de mamífero de células musculares lisas humanas e cerebelo de camundongo em sistema recombinante heterólogo de E. coli, purificar a proteína produzida por IMAC (cromatografia de afinidade a metal imobilizado) e analisar sua atividade enzimática usando como substratos DTT, GSH e cisteína. Os resultados mostram que apenas a QSOX de camundongo foi produzida com atividade e que diferentes valores de pH da reação, alteram sua funcionalidade. Concluindo, a enzima QSOX recombinante produzida em nosso laboratório dará suporte para próximos experimentos, na tentativa de encontrar possíveis funções para a enzima.pt_BR
dc.description.abstractSulfhydril oxidases are enzymes that catalyze the formation of disulfide bonds in peptides and proteins with the reduction of molecular oxygen to hydrogen peroxide. Two families of FAD-linked sulphydril oxidases have been described so far: the QSOX (quiescin sulphydril oxidase) family and the ERV/ALR (essential for respiration and vegetative growth/augmenter of liver regeneration) family. QSOX members share strong cDNA sequence identities and common amino-acidic sequence features. They display an N-terminal thioredoxin PDI (protein disulphide isomerase)-like domain and a C-terminal ERV1-like domain, which contains the FAD-binding site. The QSOX family includes the human quiescin Q6 from lung fibroblasts and sulphydril oxidases from chicken egg White, rat seminal vesicles, guinea-pig endometrial cells and mouse epidermis. Quiescin/sulphydril oxidase (QSOX) proteins have been implicated in essential cellular functions such as protein folding, elaboration of the extracellular matrix, regulation of the redox state and control of the cell cycle. The aim of this work was to express mammalian QSOX from human smooth muscle cells and mouse cerebellum in E. coli recombinant system, purify the protein by IMAC (immobilized metal affinity chromatography) and analyze its enzymatic activity using some substrates like DTT, GSH and cysteine. Results show that only mouse QSOX was produced in an active form and that different pH values alters its activity. In conclusion, the recombinant QSOX produced in our laboratory will give support for next experiments trying to find out possible functions to the enzyme.pt_BR
dc.format.extent50f. : il. algumas color.pt_BR
dc.format.mimetypeapplication/pdfpt_BR
dc.languagePortuguêspt_BR
dc.relationDisponível em formato digitalpt_BR
dc.subjectEnzimaspt_BR
dc.subjectTesespt_BR
dc.subjectCitologia e biologia celularpt_BR
dc.subjectBiologia molecularpt_BR
dc.titleQSOX recombinante de mamífero : produção, purificação e atiidade enzimáticapt_BR
dc.typeDissertaçãopt_BR


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