Teste de micronúcleos em células epiteliais bucais de pacientes com Anemia de Fanconi

Abstract

Resumo: Pacientes diagnosticados com Anemia de Fanconi (AF) têm risco 700 vezes maior para o desenvolvimento de carcinoma espinocelular (CEC) oral do que a população geral. Por esse motivo, medidas de rastreamento e diagnóstico precoce de desordens orais potencialmente malignas (DOPM) e CEC nesse grupo de pacientes precisam ser elaboradas. Citologia esfoliativa associada ao teste de micronúcleos (MN) como um biomarcador celular pode ser uma alternativa já que esse está associado com instabilidade cromossômica e genotoxicidade. O objetivo deste estudo é avaliar a frequência relativa de micronúcleos (FRMN) em células epiteliais bucais de pacientes com AF. Foram incluídos no estudo 46 pacientes com AF que realizaram o Transplante de Células-Tronco Hematopoiéticas (TCTH) ou não com ou sem DOPM. Foram coletados esfregaços celulares por meio da técnica de citologia esfoliativa convencional da mucosa jugal e bordo lingual bilateral dos participantes, além de todas as DOPM identificadas na amostra. As células coletadas foram coradas pela reação de Feulgen. A FRMN foi calculada a cada 1000 células. Participaram da pesquisa 27 mulheres e 19 homens, com faixa etária de 4 a 42 anos de idade, sendo que 32 destes já haviam realizado TCTH. Os participantes foram divididos em 3 grupos, sendo o grupo 1 de pacientes com AF não transplantados e sem DOPM, o grupo 2 de pacientes pós TCTH e sem DOPM e o grupo 3 pós TCTH com DOPM. A maior parte dos participantes (28) apresentou FRMN maior que o limite superior considerado normal na população geral. A média da FRMN total nos pacientes dos grupos 1, 2 e 3 foram, respectivamente, 1,57, 2,16 e 4,49. Apesar disso, os testes estatísticos não demonstraram diferença significativa na FRMN total entre os grupos. Quando comparada a FRMN em mucosa íntegra e mucosa com DOPM dos participantes do grupo 3, foi possível identificar diferença estatisticamente significante, onde os pacientes apresentaram maior FRMN em mucosas com DOPM. Além disso, identificou-se que a idade dos pacientes (principalmente na faixa etária de 26 a 30 anos) e o tempo pós TCTH de 16 a 20 anos influenciam no aumento da FRMN. Conclui-se que o teste de FRMN pode ser um método complementar para mensurar a predisposição de pacientes diagnosticados com AF para o desenvolvimento de CEC oral, favorecendo o diagnóstico precoce e possibilitando melhor prognóstico e sobrevida.

Abstract: Patients diagnosed with Fanconi Anemia (FA) are 700 times more likely to develop oral squamous cell carcinoma (SCC) than the general population. For this reason, screening measures and early diagnosis of oral potentially malignant oral disorders (OPMD) and SCC in this group of patients need to be developed. Exfoliative cytology associated with the micronucleus test (MN) as a cellular biomarker can be an alternative since this is associated with chromosomal instability and genotoxicity. The aim of this study is to evaluate the relative frequency of micronuclei (FRMN) in oral epithelial cells from patients with FA. Forty-six patients with FA who underwent Hematopoietic Stem Cell Transplantation (HSCT) or not with or without OPMD were included in the study. Cell smears were collected using the conventional exfoliative cytology technique from the buccal mucosa and bilateral lingual border of the participants, in addition to all OPMD identified in the sample. The collected cells were stained by the Feulgen reaction. FRMN was calculated every 1000 cells. The participants were 27 women and 19 men, aged between 4 and 42 years old, 32 of whom had already undergone HSCT. Participants were divided into 3 groups: group 1 of patients with non-transplanted FA and without OPMD, group 2 of post-HSCT patients without OPMD and group 3 of post-HSCT with OPMD. Most participants (28) had FRMN greater than the upper limit considered normal in the general population. The mean total FRMN in patients in groups 1, 2 and 3 were, respectively, 1.57, 2.16 and 4.49. Despite this, statistical tests did not demonstrate a significant difference in total FRMN between groups. When comparing the FRMN in intact mucosa and the mucosa with OPMD of the participants in group 3, it was possible to identify a statistically significant difference, where patients had greater FRMN in mucous membranes with OPMD. In addition, it was identified that the age of the patients (mainly in the age group of 26 to 30 years) and the post-HSCT time of 16 to 20 years influence the increase in FRMN. It is concluded that the FRMN test can be a complementary method to measure the predisposition of patients diagnosed with FA to the development of oral SCC, favoring early diagnosis and enabling better prognosis and survival.