| dc.description.abstract | Resumo : A miostatina (GDF-8) pertence à superfamília de Fatores de Crescimento e Diferenciação 13 (TGF-I3) e foi identificada em 1997 por MCPHERRON et aI .. Ao nocautear o gene da miostatina, MCPHERRON et aI. notaram que mutantes adultos apresentaram um formato anormal de corpo, com ombros e quadris pronunciados, e quando a pele foi removida de animais mortos, era aparente que os músculos dos mutantes eram muito maiores do que os dos selvagens. Esse aumento muscular revelou ser resultado de hiperplasia e hipertrofia. A compreensão do padrão de expressão da miostatina é importante para a tentativa de se criar estratégias de manipulação desse gene in vitro e in vivo. No presente trabalho, buscou-se localizar, através do uso de ferramentas da Bioinformática, os elementos cis-regulatórios (promotor e enhancers) que atuam sobre a atividade de transcrição do gene da miostatina. Através da comparação dos lóci do GDF8 humano, de camundongo e galinha, foram encontradas diferentes regiões evolutivamente conservadas (ECRs) entre essas espécies que, por terem permanecido intactas ao longo da evolução, representam fortes candidatas a elementos regulatórios. No lócus da miostatina, foi observado que há uma alta identidade de seqüência entre humano, camundongo e galinha na região dos três exons. Entretanto, com relação aos introns, a similaridade foi elevada quando a comparação foi realizada apenas entre os dois mamíferos; apesar de o nível de similaridade entre humano, camundongo e galinha ter sido baixo nessas regiões, foi identificado um sítio de ligação conservado entre as três espécies para o fator de transcrição XPF1 no primeiro intron. Na região upstream ao gene GDF8 foi identificada apenas uma ECR, localizada imediatamente adjacente ao gene. Ao realizar uma busca por sítios de ligação para fatores de transcrição conservados nessa região, foi detectada a presença, dentre outros, de um sítio para o fator TBP (Tata Binding Protein), o que reforça a hipótese de que essa região corresponda ao promotor do gene da miostatina. A busca por regiões conservadas entre as três espécies na região downstream ao GDF8 revelou a presença de três ECRs. Na ECR1 não foi identificado nenhum sítio de ligação para fatores de transcrição, ao contrário da ECR2. Nesta foram encontrados 15 tipos de sítios, entre eles sítios para fatores relacionados ao desenvolvimento da musculatura esquelética como MyoD e miogenina que interagem com o E-box, além de sítios para Pax3. Ainda na ECR2 foram encontrados sítios para fatores relacionados ao desenvolvimento cardíaco, como TEF1 e TBX5. Já na ECR3 foram identificados apenas dois sítios de ligação para fatores de transcrição, dentre eles um sítio para ERR1, que é super-expresso durante diferenciação de adipócitos, indicando que essa ECR possa ser a responsável pela regulação da expressão da mistatina em adipócitos, enquanto que a ECR2 possa regular a transcrição da miostatina em musculatura esquelética e no coração. Os resultados teóricos desse trabalho serão, no futuro, testados com o auxílio de experimentos práticos que possam vir a confirmar os dados encontrados. | pt_BR |
