Susceptibilidade a antimicrobianos e caracterização molecular de isolados de streptococcus pyogenes na Cidade de Curitiba, Estado do Paraná.

Abstract

Resumo: O Streptococcus pyogenes é considerado importante por sua grande habilidade de colonizar, infectar e lesionar tecidos humanos. Este microrganismo está associado a um largo espectro de doenças, afeta pessoas com uma simples faringite ou pode desenvolver formas graves da doença estreptocócica, como meningite, sepsis ou febre reumática. O objetivo deste estudo foi avaliar o perfil de susceptibilidade aos antimicrobianos de 1112 isolados de S. pyogenes coletados de amostras clínicas de pacientes na cidade de Curitiba, estado do Paraná, durante o período de 1993 a 2009. Os isolados resistentes a macrolídeos foram caracterizados geneticamente através da tipagem emm, macrorrestrição sma\ e perfil de virulência.Todos isolados foram susceptíveis a penicilina, vancomicina, tigeciclina e bacitracina. Ao contrário, 18.6% dos isolados foram resistentes a tetraciclina, apresentando C\M50/C\M90 de 32/64 t/ml. Resistência a eritromicina foi encontrada em 29 (2,6%) dos isolados e entre estes, 7 (24,1%) apresentavam fenótipo de resistência constitutiva transportando o gene erm(B), 9 (31,0%) o fenótipo indutivo e gene erm(A) e 13 (44,8%) dos isolados apresentaram o fenótipo M e gene mef(A). A taxa de resistência a eritromicina aumentou de 1.9% no período anterior ao ano 2000 para 4% após 2000 e foi associada a um marcante aumento dos níveis dos C\Ms. Simultaneamente, ambos os fenótipos e genótipos de resistência foram se modificando, o fenótipo M [genótipo mef(A)] foi sendo substituído pelo fenótipo cMLSB [genótipo erm(B)]. Os isolados apresentando M fenótipo pertenciam ao emm12 e amplificaram os genes pfbp, prtf-2 e sciB associados a adesão e internalização dos EGA. Cinco emm-tipos (22, 58, 78, 82 e 94) representando seis diferentes pulso-tipos foram associados com o fenótipo iMLSB. Os sete isolados expressando o fenótipo de resistência constitutiva pertenciam a cinco diferentes emm- tipos (11, 22, 28, 73 e 76) correspondendo a cinco diferentes pulso-tipos. Todos os isolados transportavam os genes das exotoxinas speB, speG e speH, independente do fenótipo MLSb apresentado. A disseminação policlonal da resistência aos macrolídeos apresentando fenótipo cMLSB e gene erm(B) observada nos últimos anos, alerta para a manutenção de programas de vigilância epidemiológica para avaliar este fenômeno emergente ainda não observado na América do Sul.

Abstract: Streptococcus pyogenes is considered important by great ability to colonize, infect and injure tissues. This microorganism is associated with a wide spectrum of diseases, affecting people with a simple tonsillitis or develops severe forms of streptococcal disease as meningitis, sepsis or rheumatic fever. The aim of this study was to evaluate the profile of antimicrobial susceptibility of 1112 isolates of S. pyogenes collected from clinical specimens from patients of Curitiba, Parana state, during the period 1993 to 2009. Macrolide resistant isolates were characterized by emm typing, Pulsed Field Gel Electrophoresis and profile of virulence genes. All isolates were susceptible to penicillin, vancomycin, tigecycline and bacitracin. In contrast, 18.6% were resistant to tetracycline, presenting MIC50/MIC90 of 32/64 w/ml. Resistance to erythromycin was found in 29 (2.6%) isolates and among these, seven (24.1%) presented constitutive resistance phenotype (ermB), nine (31.0%) had phenotype inductive (ermA) and 13 (44.8%) isolates showed the M phenotype and mefA gene. The rate of erythromycin resistance increased from 1.9% in 2000 to 4% after 2000 and was associated with a marked increase in levels of MICs. Simultaneously, both the phenotype and genotype of macrolides resistance were modified as the M phenotypes (mef(A) genotype) were replaced by the cMLSB phenotypes (erm(B) genotype). The isolates with M phenotype belonged to emm12, amplified genes pfbp, prtf-2, sciB associated of compliance and internalization of GAS. Five emm-types (22, 58, 78, 82 and 94) representing six different clones (PFGE), were associated with the phenotype iMLSB. The seven isolates expressing the constitutive resistance phenotype belonged to five different emm-types (11, 22, 28, 73 and 76) corresponding to five different pulsotypes. All isolates carrying the genes for exotoxins speB, speG and speH, regardless of the MLSB phenotype presented. The spread of polyclonal macrolide resistance present phenotype cMLSB and gene erm(B) observed in recent years, alert for maintenance of epidemiological surveillance programs, to evaluate this emerging phenomenon not yet observed in South America.