Estadiamento dos embriões e larvas e avaliação da qualidade das larvas e pós larvas do peixe neotropical jundia Rhamdia quelen (Siruliformes, Heptapteridae) produzidas sob diferentes temperaturas de incubação

Abstract

A temperatura da água durante a incubação é um fator essencial no desenvolvimento dos peixes. Sendo assim, o objetivo desse estudo foi avaliar a qualidade das larvas e pós-larvas, bem como descrever as principais características morfológicas e a cronologia dos estádios do desenvolvimento embrionário e larval do jundiá (Rhamdia quelen) em diferentes temperaturas de incubação. Os embriões foram obtidos através de desova induzida e incubados a 18, 21, 24, 27 e 30ºC. Foram amostrados ao término de cada período (horas após a fertilização-hpf) do desenvolvimento embrionário de acordo com a temperatura em que foram incubados e durante o período larval: 24 horas após a eclosão (hpe), pós-larval (pós-larvas com 7 dias após a eclosão) e juvenis (30 dias após a eclosão). Foram feitos testes de fixação com o intuito de se obter o melhor método de fixação para embriões da espécie nas condições padrão de desenvolvimento (25°C ±1°C), tanto para microscopia de luz quanto para microscopia eletrônica de varredura. As amostras foram fixadas, com e sem a membrana coriônica, em paraformaldeído 4% em tampão PBS ou PB 0,1M para análises de microscopia de luz e através de três diferentes protocolos do fixador Karnovsky, para análises de microscopia eletrônica de varredura. Através da microscopia de luz e eletrônica, foram descritas as principais alterações morfológicas que caracterizam cada estádio do desenvolvimento inicial desta espécie. A qualidade das larvas eclodidas foi avaliada pela verificação da sobrevivência, freqüência cardíaca, composição centesimal, taxa de síntese protéica, bem como do número e tamanho das fibras musculares formadas nos peixes incubados em diferentes temperaturas. Malformações anatômicas foram observadas em todas as temperaturas, porém, ocorreram com maior freqüência nas temperaturas de 18 e 30°C. Em todas as temperaturas as larvas apresentaram freqüência cardíaca mais elevada que as pós-larvas, sendo este parâmetro dependente da temperatura. Foram realizadas análises da composição centesimal (lipídios e proteínas totais, peso úmido, seco e matéria mineral) das amostras e não foi verificada diferença significativa entre as temperaturas. Houve alteração da celularidade muscular em resposta à temperatura de incubação, sendo que, a 27°C, as fibras se tornaram mais espessas. Embora não tenha havido diferença significativa, verificou-se uma tendência à diminuição da densidade das fibras com o aumento da temperatura nos peixes incubados entre 21 e 27°C. A concentração de DNA e de proteínas aumentou ao longo do tempo em todas as temperaturas e a de RNA diminuiu, exceto a 24oC. A taxa de síntese protéica foi maior a 27 e 30°C. As pós-larvas apresentaram maior crescimento relativo quando incubados a 24 e 27°C, quando comparados ás temperaturas experimentais mais extremas. O crescimento protéico específico mostrou-se diretamente proporcional à temperatura. Os resultados permitem concluir que, 27°C é a melhor temperatura para incubação de embriões e larvas de R. quelen, uma vez que resulta em tempo de desenvolvimento relativamente rápido, boas taxas de sobrevivência e de crescimento, elevada síntese protéica, baixa incidência de malformações e formação de fibras musculares hipertrofiadas. As temperaturas de 18 e 30 °C não são adequadas à incubação desta espécie.

Water temperature during incubation is an essential factor in fish development. By this way, the aim of this study was to evaluate the quality of the hatched larvae and postlarvae, and to describe the main morphological features and chronology of the stages of embryonic and larval development of silver catfish (Rhamdia quelen) at different temperatures of incubation. Embryos were obtained through induced spawning and incubated at 18, 21, 24, 27 and 30°C. They were sampled at the end of each period (hours postfertilization, hpf) embryonic development according to the temperature at which they were incubated and during the larval period: 24 hours after hatching (hpe), post-larval (post-larvae 7 days after hatching) and juveniles (30 days after hatching). Fixation tests were carried out in order to obtain the best protocol for both light and scanning electron microcopies for embryos of this species in standard development conditions (25°C ± 1°C). The samples we re fixed with e without the chorionic membrane in 4% paraformaldehyde in 0.1 M PBS or PB for the analysis of light microscopy and by three different protocols of Karnovsky fixative for electron microscopy analysis. The main morphological changes characterizing each development stage were described. The quality of the hatched larvae was evaluated by checking the survival, heart rate, proximal composition, protein synthesis rate, and both number and size of muscle fibers formed in fish incubated at different temperatures. Anatomical malformations were observed at all temperatures, however, occurred more frequently at 18 and 30°C. I n all the temperatures the larvae had presented higher cardiac frequency than the post-larvae stage. The heart rate was directly correlated to temperature. There was not significant difference in proximal composition (lipids, proteins, moisture, and ash) among temperatures. Muscle cellularity change with temperature. Muscle fibers became thicker at 27°C. A trend (not significant) to the reduction of the density of staple fibres with the increase of the temperature was verified in the fish incubated among 21 and 27°C.The protein and DNA concentration increased throughout the time in all temperatures and RNA concentration decreased, except 24°C. Protein synthesis rate was higher at 27 e 30°C. Relative growth rate was higher at 24 and 27°C i n comparison to extremer experimental temperatures. Specific protein growth rate was directly correlated to temperature. The present results suggest that 27°C is the optimal temperature to R. quelen embryo and larvae incubation, since it result in relatively fast development, good survival, high growth and protein synthesis rates, low malformations occurrence, and formation of hypertrophyc muscle fibers. The extreme temperatures (18 e 30°C) are not recomended to incubation of this species.