Caracterização molecular de isolados de Staphylococcus aureus e produção de marcadores genéticos para diagnóstico de mastite em bovinos leiteiros

Abstract

Resumo: Neste trabalho objetivou-se investigar o polimorfismo genético do Staphylococcus aureus causador de mastite bovina, por meio de RAPD. A análise de distância realizada pelo algoritmo UPGMA, identificou dois grupos desse agente etiológico. Por meio de marcadores RAPD, foi possível isolar bandas específicas de cada grupo, inseri-las em vetor pGEMTM (Promega Corporation), utilizando a linhagem TOP 10 F1 de Escherichia coli. Suas seqüências permitiram desenhar oligonucleotídeos iniciadores para identificação de ambos os biosorotipos. A elaboração de uma reação de multiplex-PCR, serviu para monitorar precocemente infecções por S. aureus em matrizes ainda jovens, e em tanque de leite, o que permitirá reduzir enormemente os prejuízos causados pela doença.

Abstract: This work investigates genetic polymorphism among Staphylococcus aureus causing bovine mastitis by RAPD. Distance analysis by the UPGMA algorithm was carried out the identification of two ethiological agent groups. Although, morphologic and biochemical aspects were apparently the same, after the isolation of these differences was possible to delineate the nucleotides sequences in serumtypes by means of plasmid vector insertion (Promega Corporation) using TOP 10 F1 Escherichia coli ancestry. These sequences allowed design primers to identify these serumtypes and in an elaboration of a multiplexPCR reaction, it allowed to monitor infections by S. aureus, precociously in still young matrices and into milk tank, a result that will reduce economic damages comed by the illness.