Sistema reprodutivo, banco de sementes e propagação in vitro de Brasilliorchis R.B. Singer et al. Christensonella Szlach et al. Maxillariella M. A. Blanco & Carnevali e Mormolyca Fenzl.

Abstract

Resumo: Orchidaceae A. Juss. é uma das famílias mais representativas dentre as Angiospermas. É constituída de flores ornamentais e de corte, de grande beleza que corre risco de extinção, devido às coletas predatórias e por seu grande potencial econômico. O principal objetivo deste trabalho foi estabelecer estratégias para micropropagação e conservação ex situ de plantas pertencentes aos gêneros Brasiliorchis, Christensonella, Maxillariella e Mormolyca. Foi analisada a biologia reprodutiva das espécies a partir de polinização manual, observando-se que a formação de tubos polínicos compatíveis ocorreu somente nas flores com polinização cruzada e para autopolinização houve a formação de tubos polínicos irregulares, com ou sem formação de calose. Nas flores autopolinizadas ocorreu queda das flores impedindo a formação de fruto e sementes. As sementes foram armazenadas a -20oC e -80oC, por 1, 3, 6, 9 e 12 meses. Para avaliar a viabilidade das sementes foi utilizado o teste do tetrazólio (TTZ), constatando-se que sementes não armazenadas apresentaram resultados superiores quando comparadas com as sementes armazenadas. A temperatura de -20°C pode ser indicada para o armazenamento de sementes de M. robusta e B. schunkeana e de - 80oC para B. picta e M. rufescens. Sementes recém-colhidas e armazenadas de Brasiliorchis picta e B. schunkeana foram germinadas nos meios KC, MS, MS/2 e WPM. Para ambas as espécies, a porcentagem de germinação foi mais alta em sementes sem armazenamento, seguida das armazenadas a -20°C e os melhores meios de cultura foram MS e WPM. Recomenda-se o meio WPM para a germinação in vitro por permitir crescimento e vigor das plântulas, sem que ocorra mortalidade. As plântulas de B. picta foram aclimatizadas com sucesso com o uso de vermiculita como substrato. Para a micropropagação das espécies Mormolyca rufescens e Brasiliorchis picta foram utilizadas folhas inteiras e TCLts ("thin cell layer" transversal) apicais, medianos e basais. Os explantes foram cultivados em meio MS/2, contendo BAP (2,5; 5,0 e 10 M) ou TDZ (3, 6 e 9 M) durante 90 dias. Os resultados indicaram que ocorreu regeneração direta de PLBs nos explantes foliares, com maior freqüência para B. picta do que para M. rufescens. As folhas inteiras de M. rufescens e TCLts das duas espécies apresentaram maiores porcentagens de regeneração de PLBs em meio contendo 9 M de TDZ. A região basal dos explantes foliares foi a mais responsiva. A técnica TCLt é promissora para a propagação clonal de B. picta e M. rufescens. Palavras-chave: polinização, germinação, micropropagação, transplantio.

Abstract: Orchidaceae A. Juss. is one of the most representative families among the Angiosperms. It is constituted of ornamental and cut flowers, which are endangered for their beauty due to predatory picking and great economic potential. The main objective of this work was to establish strategies for ex situ conservation of plants belonging to Brasiliorchis, Christensonella, Maxillaria and Mormolyca genera. The reproductive biology of species was analyzed through manually pollination, when it was observed that the formation of compatible pollinic tubes only occurred in flowers after crossed-pollination and after autopollination, the formation of irregular pollinic tubes was observed, with or without callus formation. In self-pollinated flowers, the flowers falled and blocked the formation of the fruit and seeds. The seeds were stored at -20ºC and -80ºC, for 1, 3, 6, 9 and 12 months. Seed viaibility was evaluated by the tetrazolium test (TZ), and it was observed that non-storing seeds showed better results when compared to stored seeds. The temperature of -20ºC can be indicated for the storage of the seeds of M. robusta and B. schunkeana, and -80ºC to store B. picta and M. rufescens. Freshly harvested and stored seeds of Brasiliorchis picta and B. schunkeana were germinated on KC, MS, MS/2 and WPM culture media. For both species, the percentage of germination was higher in nonstoring seeds, followed by the stored ones in -20ºC and the best media for culture were MS and WPM. WPM is recommended for in vitro germination allowing the growth and vigor of seedlings, without the occurrence of mortality. The seedlings of B. picta were acclimatized with success with the use of vermiculite as substrate. For micropropagation Mormolyca rufescens and Brasiliorchis picta species were utilized whole leaves and apical, median and basal TCLts. The explants were cultivated on MS/2 medium, containing BAP (2.5; 5.0 and 10 M) or TDZ (3, 6 and 9 M) during 90 days. The results indicated that direct regeneration of PLBs in the foliar explants, occurred with higher frequency for B. picta than for M. rufescens. The whole leaves of M. rufescens and TCLts of both species showed larger percentage of regeneration of PLBs in medium containing 9 M TDZ. The basal region of the foliar explants was the most responsive one. The TCLt technique is promising for clonal propagation of B. picta and M. rufescens. Key-words: pollination, germination, micropropagation, transplanting.