Produção de anticorpos policlonais anti-proteínas recombinantes quiescina sulfidril oxidase e prion celular

Abstract

Resumo : Neste trabalho estudamos dois tipos diferentes de proteínas. Uma delas é da família das quiescinas sulfidril oxidases (QSOx). Estas proteínas estão envolvidas na formação de pontes dissulfeto e dobramento oxidativo de uma grande variedade de proteínas. A proteína QSOx é bastante ubíqua e pode ser encontrada em vários tecidos e secreções como na clara do ovo, no trato reprodutivo masculino, no fluído de vesículas seminais e em soro fetal bovino. Especula-se que QSOX possa participar na regulação do ciclo celular, manutenção estrutural das proteínas de matriz extracelular, até provável envolvimento no desenvolvimento embrionário. A outra é a proteína prion celular (PrPc) que, possivelmente, está relacionada com doenças neurodegenerativas, plasticidade neuronal, cognição e memória. Na tentativa de elucidar algumas das funções desempenhadas por estas proteínas, produziram-se ferramentas que podem auxiliar no estudo de QSOx e PrPc. Tais ferramentas incluem a produção de anticorpos policlonais que foram testados por ensaio de ELISA. O método de ELISA utilizado foi o de captura de anticorpo que tem como objetivo detectar e quantificar anticorpos na amostra de soro do animal. Esse método consiste em sensibilizar a placa com antígeno, colocar o soro do animal imunizado junto com um marcador anti-lgG e observar a presença dos anticorpos. No caso de QSOX, além da produção de anticorpos, foi feita expressão heteróloga para produção de proteínas recombinantes para utilização em ensaios bioquímicos.