Efeito da anandamida e de drogas que interferem no sistema endocanabinóide na dor neuropática diabética

Abstract

Resumo: A dor neuropatica e uma grave e debilitante complicacao do diabetes. Um dos problemas do tratamento desta complicacao e a refratariedade aos tratamentos vigentes, tornando-os paliativos e sintomaticos. Alem disso, os diversos efeitos colaterais os tornam altamente restritos. Nesse sentido, estudos vem buscando o melhor entendimento da fisiopatologia da dor neuropatica diabetica (DND) e a proposicao de novas alternativas terapeuticas. Nesse contexto, drogas que atuam no sistema endocanabinoide aparecem como promissoras para o tratamento de dores cronicas, como a DND. Assim, o presente estudo tem como objetivo investigar o potencial antinociceptivo desta classe de drogas na hiperalgesia quimica induzida por formalina quando injetadas perifericamente na regiao dorsal da pata ipsilateral (via subcutanea) de ratos normoglicemicos (Ngl) ou com diabetes quimicamente induzido por estreptozotocina (STZ). Foi observado que animais diabeticos (Dbt) exibiram maior numero de sacudidas na pata (flinches) em resposta a injecao de formalina (0,5%; 50 SL) durante a primeira (neurogenica) e segunda (inflamatoria) fases do teste quando comparados as respostas nociceptivas exibidas pelos animais Ngl, indicando a presenca de hiperalgesia quimica em animais diabeticos. A administracao local de AM404 (inibidor da recaptacao de anandamida-AEA), AEA (agonista misto endogeno) ou ACEA (agonista seletivo para receptores canabinoides do tipo CB1) reduziu significativamente o numero de flinches em ambas as fases do teste da formalina em animais Ngl e Dbt. Em ambos os grupos experimentais (Ngl e Dbt), o efeito antinociceptivo da AEA foi prevenido pelo pre-tratamento local com antagonistas seletivos de receptores canabinoides do tipo CB1 (AM251) ou CB2 (AM630), sendo o AM251 capaz de prevenir o efeito da AEA em ambas as fases do teste, enquanto que o AM630 foi capaz de prevenir o efeito do tratamento somente na segunda fase do teste. Adicionalmente, o efeito do ACEA foi significativamente prevenido pelo tratamento previo local com AM251 nos animais Ngl e Dbt. Por fim, nos animais Dbt, o efeito antinociceptivo do AM404 foi prevenido pelo tratamento local com AM251 ou AM630, assim como observado quando do tratamento com AEA. No entanto, nos animais Ngl, o tratamento com AM251 foi capaz de prevenir o efeito antinociceptivo do AM404 somente na primeira fase do teste enquanto que o tratamento com AM630 nao alterou o efeito do AM404 em nenhuma das fases. Em conjunto, os resultados demonstram propriedades antinociceptivas de drogas que atuam via sistema endocanabinoide em modelo de neuropatia dolorosa diabetica quando administradas perifericamente. Os receptores canabinoides do tipo CB1 parecem mediar o efeito da AEA, do ACEA e do AM404 nas fases neurogenica e inflamatoria do teste da formalina, enquanto que os receptores do tipo CB2 sao importantes para o efeito antinociceptivo da AEA e do AM404 na fase inflamatoria. Considerando a nao responsividade dos animais diabeticos aos opioides, a observacao de que a administracao local de drogas que ativam os receptores canabinoides seja capaz de reverter o quadro de hiperalgesia quimica nesses animais parece promissor.

Abstract: Diabetes is often associated with painful neuropathy. Since the mechanism underlying diabetic neuropathic pain remains poorly understood, the current treatments are palliative and symptomatic, mostly restricted by dose-limiting side effects. It has been proposed that agents that affect the endocannabinoid system are promising drugs for chronic pain treatment. Antinociceptive effect of cannabinoids has already been related previously in peripheral or spinal nerve injury models of neuropathic pain, but very little has been investigated in animal models of painful diabetic neuropathy. Thus, the current study aims to investigate the potential antinociceptive effect of drugs that alter endocannabinoid system injected subcutaneously into the dorsal surface of the ipsilateral hind paw in chemical hyperalgesia induced by formalin in both normoglycemic and streptozotocin-diabetic rats. Diabetic rats exhibited exaggerated flinching behaviors during first and second phases of the formalin test, indicating the presence of hyperalgesia. Treatment with AM404, an anandamide (AEA) re-uptake inhibitor, AEA (an endogenous agonist of CB1 and CB2 receptors) or ACEA (a highly selective CB1 receptor agonist) induced a significant antinociception in both phases of formalin test in normoglycemic (Ngl) and diabetic (Dbt) rats. In both Ngl and Dbt rats, the antinociceptive effect of ACEA was prevented by pretreatment with AM251, a CB1 receptor antagonist while the antinociceptive effect of AEA was significantly prevented by pretreatment with AM251 or AM630, a CB2 receptor antagonist. In Ngl rats, the antinociceptive effect of AM404 was significantly prevented by AM251 only during first phase of the formalin test while in Dbt rats, this effect was blocked by pretreatment with AM251 (both phases) and AM630 (second phase). Taken together, these results demonstrated broad-spectrum antinociceptive properties of cannabinoids in a model of painful diabetic neuropathy when administered peripherically. Peripheral activation of both CB1 and CB2 cannabinoid receptors seems to mediate the antinociceptive effect of exogenous or endogenous anandamide, probably CB1 receptors expressed on primary afferent nociceptors and CB2 receptors presented on inflammatory cells as mast cells.