Efeito da Toxina Botulínica Tipo-A sobre um modelo de nocicepção trigeminal

Abstract

Resumo: A neurotoxina botulínica do tipo A (NTBo-A) é uma substância com efeito sobre o sistema colinérgico, autonômico e sobre neurotransmissores envolvidos nos mecanismos nociceptivos. Sua utilização em síndromes álgicas tem sido indicada com resultados conflitantes. O objetivo do estudo é avaliar o efeito antinociceptivo da NTBo-A em modelos de dor aguda (tratamento preventivo) e crônica (efeito analgésico). Para dor aguda utilizamos um modelo de dor induzida pela formalina 2,5% (TF) aplicada sobre o segundo ramo do trigêmeo (lábio superior) e para dor crônica modelo de constrição do nervo infra-orbital (NIO) submetido ao teste do menos 200C. Cento e oitenta e quatro animais Rattus norvegicus foram alocados durante as duas fases do estudo. Fase 1 – Dor aguda (n=95 animais) divididos em dois grupos conforme o tratamento prévio ao TF: (grupo NTBo-A e grupo SSI) cada grupo foi subdividido em seis subgrupos conforme o período da realização do TF após o tratamento (subgrupos: 24 horas; 8 dias; 15 dias; 22 dias; 29 dias e 36 dias). Os animais foram submetidos a dois tratamento com SSI e o mesmo para o grupo NTBo-A. Os TF foram realizados após os respectivos tratamentos. Fase 2 – Um total de 89 animais foi submetido ao teste do -200C. Os animais foram selecionados e divididos em quatro grupos: Grupo 1 – animais submetidos a constrição do nervo infra-orbital (NIO) e tratados posteriormente com NTBo-A (n=8); Grupo 2 – Animais submetidos a constrição do NIO e tratados com SSI (n=8); Grupo 3 – Animais submetidos a exposição do NIO e tratados com NTBo-A (n=7); Grupo 4- Animais submetidos a exposição do NIO e tratados com SSI (n=8). A atividade motora foi avaliada na Fase 1 utilizando-se do teste do campo aberto. Também na fase 1 foram aplicados testes comportamentais (teste do labirinto em cruz elevada e teste do campo claro versus escuro). Os resultados mostraram que o efeito antinociceptivo profilático ocorreu somente para o grupo NTBo-A subgrupo 8 dias, após o primeiro tratamento e somente durante a fase inflamatória do TF (p=0,011), todas as outras comparações não foram significativas. O efeito antinociceptivo analgésico ocorreu seis horas após a aplicação da NTBo-A (Grupo 1 versus 2 p=0,026) mantendo-se durante as avaliações de 24 horas após o tratamento (p= 0,012), 48 horas (p=0,046), 72 horas (p=0,048) voltando a um estado de hipernocicepção 96 horas após (p=1). A atividade motora não foi alterada nos animais submetidos a NTBo-A. Os animais avaliados 24 horas após o uso de NTBo-A apresentavam-se mais ansiosos e os avaliados 29 dias após apresentavam menores escores de ansiedade. Concluímos que a NTBo-A apresenta efeito preventivo em um modelo de dor aguda quando utilizada até 8 dias; repetidas aplicações de NTBo-A não potencializam este efeito. A NTBo-A pode ser considerada como uma droga analgésica sendo capaz de dessensibilizar um estado de dor crônica iniciando-se 6 horas após e mantendo-se por até 72 horas. Em conclusão a NTBo-A tem ação preventiva e analgésica sobre a nocicepção trigeminal.

Abstract: Botolinum Toxin Type-A Effect Over the Trigeminal Nociception Model: Botulinum neurotoxin type A (BoNT-A) is a substance with effect on the cholinergic and autonomic neural transmission involved in nociceptive mechanisms. Its use in pain syndromes has been indicated, however with conflicting results. This study aims to evaluate the antinociceptive effect of BoNT-A in models of acute pain (preventive treatment) and chronic pain (analgesic effect). The acute pain model consisted of induction by formalin 2.5% test (FT) applied to the second branch of the trigeminal nerve (upper lip) and the chronic pain model consisted of constriction of the infra-orbital (ION) nerve submmitted to the test of -20°C. One hundred and eighty-four animals, Rattus norvegicus, were allocated during the two phases of the study. Phase 1 - Acute pain (n= 95 animals) were divided into two groups according to prior treatment the FT: (BoNT-A group and saline group) each group was subdivided into six subgroups according to the period of implementation of FT after treatment (subgroups : 24 hours, 8 days, 15 days, 22 days, 29 days and 36 days). The animals of each group (saline and BoNT-A) were submmitted to two batteries of treatment at two different timelines with a 42-day interval. The TF were performed after the respective treatments. Phase 2 - A total of 89 animals were tested with the -20°C. The Rattus norvegicus were selected and divided into four groups: Group 1 - animals subjected to constriction of the ION and subsequently treated with BoNT-A (n= 8), Group 2 - animals subjected to constriction of the ION and treated with SSI (n= 8) and Group 3 - animals subjected to exposure ION and treated with BoNT-A (n= 7), Group 4 - animals subjected to exposure of the ION and treated with saline (n= 8). Motor activity was evaluated in Phase 1 using the Open Field Test. Also, in phase 1 behavioral test was applied (test of High-Maze Test and Light Field versus Dark Field). The results showed that the prophylactic analgesic effect occurred only among the BoNT-A sub-group 8th-day measurement after the first treatment, and only during the inflammatory phase of TF (p= 0.011). All other comparisons were not significant. The antinociceptive analgesic effect occurred six hours after application of BoNT-A (Group 1 versus 2 p= 0.026) remained in the 24 hours evaluations (p= 0.012), 48 hours (p= 0.046), 72 hours (p= 0.048) after treatment, returning to a state of hypernociception at 96 hours after treatment (p=1). Motor activity was not altered in animals subjected to BoNT-A. The animals evaluated 24 hours after the use of BoNT-A had become more anxious. Those evaluated 29 days after BoNT-A, had lower scores of anxiety. We conclude that BoNT-A has a preventive effect in a model of acute pain when used up to 8 days and that repeated applications of BoNT-A did not potentiate this effect. The BoNT-A may be regarded as an analgesic drug being able to desensitize a state of chronic pain starting 6 hours after and maintained for 72 hours. In conclusion, BoNT-A has analgesic and preventive action on trigeminal nociception.